關(guān)于自動進(jìn)樣器在HPLC分析中的應(yīng)用
更新時(shí)間：2017-03-27
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自動進(jìn)樣器在生化分析儀器，色譜分析儀器中有著廣泛應(yīng)用，它的運(yùn)行可靠性和性直接影響著分析結(jié)果。液相色譜系統(tǒng)大多使用自動進(jìn)樣器引入樣品，正確使用自動進(jìn)樣器是保證液相色譜系統(tǒng)分離度的基本條件，用自動進(jìn)樣器注入適當(dāng)體積的標(biāo)準(zhǔn)樣品可為峰高和峰面積的測量提供小于1%的標(biāo)準(zhǔn)偏差。
對于液相色譜而言，無論是手動進(jìn)樣器或是自動進(jìn)樣器都是用六通閥進(jìn)樣的，只是自動進(jìn)樣的較手動進(jìn)樣器的死體積較大，多了計(jì)量泵和一部分聯(lián)接管線。自動進(jìn)樣器可以減少體力勞動，增加樣品處理量，提高日常工作精度。
現(xiàn)在的色譜實(shí)驗(yàn)室，大都使用六通進(jìn)樣閥或自動進(jìn)樣器。進(jìn)樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復(fù)性好，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。HPLC分析進(jìn)樣方式可分為：隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動進(jìn)樣。
1.隔膜進(jìn)樣。
用微量注射器將樣品注入專門設(shè)計(jì)的與色譜柱相連的進(jìn)樣頭內(nèi)，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心，死體積幾乎等于零，可以獲得*的柱效，且價(jià)格便宜，操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng)，使進(jìn)樣重復(fù)性只能達(dá)到1～2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到，常規(guī)分析使用受到限制。
2.停流進(jìn)樣。
可避免在高壓下進(jìn)樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時(shí)往往會出現(xiàn)“鬼峰”;另一缺點(diǎn)是保留時(shí)間不準(zhǔn)。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。
3.閥進(jìn)樣。
一般HPLC分析常用自動進(jìn)樣器六通進(jìn)樣閥，其關(guān)鍵部件由圓形密封墊子(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在，柱效率低于隔膜進(jìn)樣(約下降5～10%左右)，但耐高壓(35～40MPA)，進(jìn)樣量準(zhǔn)確，重復(fù)性好(0.5%)，操作方便。
